一、前期準備

 

　　設備檢查

 

　　在開始實驗前，仔細檢查所有器械是否完好無損，包括顱骨鉆孔器、微注射泵、顯微手術器械套裝、立體定位儀和溫度控制系統等。確認各部件功能正常，避免因設備故障影響實驗進程。

 

　　材料準備

 

　　準備好所需的耗材，如注射器、針頭、消毒劑、固定適配器等，并確保它們已進行適當的滅菌處理。對于涉及藥物注射的實驗，提前準備好所需藥物并標注清楚劑量和濃度。

 

　　環境控制

 

　　確保實驗室環境符合實驗要求，特別是溫度和濕度的控制。為小動物提供適宜的環境溫度，防止應激反應對實驗結果的影響。

 

　　二、動物麻醉與固定

 

　　麻醉處理

 

　　根據實驗設計選擇合適的麻醉藥物及劑量，通常采用異氟烷等。確保麻醉深度適中，既能使動物處于穩定狀態，又不會過度抑制呼吸和心跳。

 

　　立體定位儀固定

 

　　將麻醉后的大小鼠放置在立體定位儀上，使用耳棒和鼻夾固定頭部位置。調整三維坐標系統，使目標腦區位于操作視野中心。

 

　　三、顱骨鉆孔

 

　　標記鉆孔位置

 

　　使用標記筆在顱骨表面標出預定鉆孔位置，參照標準腦圖譜確定目標區域坐標。確保標記清晰可見，便于后續操作。

 

　　開孔操作

 

　　使用顱骨鉆孔器，在標記點處緩慢鉆孔，注意控制力度和速度，避免損傷下方腦組織。同時，利用冷卻系統減少熱損傷風險。

 

　　四、微注射操作

 

　　注射器準備

 

　　根據實驗需求選擇合適規格的注射器，并精確量取所需藥物或標記物。連接注射器至微注射泵，設定流速參數。

 

　　注射過程

 

　　緩慢推進注射針頭進入預定深度，啟動微注射泵進行微量注射。密切觀察注射過程中的壓力變化，確保液體均勻注入目標區域。